ANÁLISIS DE LOS POLIMORFISMOS +869T>C Y +915G>C EN EL GEN TGFB1, LA EXPRESIÓN DE TGF-β (ISOFORMAS SOLUBLES, mRNA Y EXPRESIÓN EN PIEL) Y SUS RECEPTORES (TGF-βR1 Y TGF-βR2) EN ESCLEROSIS SISTÉMICA

Abstract

Introducción: La esclerosis sistémica (ES) es una enfermedad autoinmune rara con alta mortalidad, caracterizada por inflamación crónica y fibrosis; los cuales son dos procesos asociados con niveles incrementados del factor de crecimiento transformante β (TGF-β). Objetivo: Evaluar el impacto de los polimorfismos +869T>C y +915G>C del gen TGFB1, la expresión de TGF- (isoformas solubles, mRNA y expresión en piel) y sus receptores (TGF-R 1 y TGF-R2) como factores de riesgo en pacientes con ES. Métodos: se incluyeron 56 pacientes con ES y 120 sujetos control no relacionados (SC) del sur de México. Los genotipos de los polimorfismos +869T>C y +915G>C del gen TGFB1 se identificaron mediante la técnica reacción en cadena de la polimerasa-polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción (PCR-RFLP) y los niveles de las isoformas solubles de TGF-β (sTGF-β) se cuantificaron mediante inmunoensayos con microesferas magnéticas (MAGPIX). La expresión del mRNA de TGFB1 se determinó mediante qPCR, mientras que la caracterización in situ de TGF-β y los receptores TGF-βR1 y TGF-βR2 se realizó mediante tinción inmunohistoquímica de biopsias de piel. Resultados: Para el polimorfismo +869T>C, el genotipo CC se asoció con riesgo a ES mediante el modelo de herencia dominante (p = 0.040; OR = 2.82; IC = 1.021-7.793). Asimismo, el alelo C se asoció con 1.73 veces más riesgo para desarrollar ES (p = 0.020; OR = 1.73; IC = 1.087-2.762) comparándolo con el alelo T. Respecto al polimorfismo +915G>C, se observó una asociación del genotipo GC con riesgo a ES mediante un modelo dominante (p = 0.006; OR = 11.67; IC = 1.289-96.754); de manera similar, el alelo C se asoció con 11.17 veces más riesgo para el desarrollo de ES (p = 0.023; OR = 11.17; IC = 1.289-96.754). Por otra parte, la concentración de las tres isoformas de sTGF-β fue mayor en SC que en pacientes con ES (p0.05). La comparación de la expresión de

2 TGF-β1, TGF-βR1 y TGF-βR2 en biopsias de piel mostró que los pacientes con ES tienen mayor expresión de TGF-β1 y sus receptores que los SC a nivel de piel. Además, encontramos que el TGF-βR1 se encontró expresado en núcleo de SC, mientras que en pacientes con ES solamente se encontró en membrana y citoplasma. Conclusión: Ser portador de algún alelo polimórfico de ambas variantes estudiadas confiere susceptibilidad a padecer ES, sin embargo, la expresión del mRNA y de las isoformas solubles se observa que es menor en pacientes con ES que en SC. Por el contrario, la expresión en piel de TGF-β1, se observa aumentada significativamente en pacientes con ES que en SC y por lo tanto, existen mecanismos que regulan la expresión de TGF-β en diferentes estirpes celulares que contribuyen a la heterogeneidad de la ES.