Establecimiento de cultivos de células de Lupinus spp. para la obtención de alcaloides

Abstract

Lupinus exaltatus y Lupinus elegans son especies nativas de México, y en el estado de Jalisco se localiza en zonas abiertas en bosques de pino-encino. Se caracterizan por contener alcaloides que actúan contra microorganismos, mamíferos, insectos. Se establecieron cultivos de callo para determinar la presencia de alcaloides en sus extractos. Se evaluaron las auxinas ácido naftalenacético, ácido 2,4-diclorofenoxiacético y picloram y la citocinina cinetina usando el medio de cultivo Murashige y Skoog. La inducción de callo se realizó con explantes de tallo de plántulas de cultivo in vitro de 36 d de edad. Para L. exaltatus los tratamientos con picloram (5.37 μM) y cinetina (0.54 μM o 10.74 μM) mostraron los mayores porcentajes de inducción (100 %), mientras que en L. elegans el mayor porcentaje (68.75 %) ocurrió con 2,4-diclorofenoxiacético (16.11 μM) y cinetina (16.11 μM); además, mostraron callos friables, los cuales puede ser usados para el establecimiento de cultivos de células en suspensión. Los extractos de cultivos de callo, plántulas de los cultivos in vitro y planta silvestre, de ambas especies, fueron comparados mediante cromatografía en capa fina, observándose solo presencia de alcaloides en los extractos de la planta silvestre y en plántulas de cultivo in vitro. En los callos del mejor tratamiento de L. exaltatus (5.37 μM picloram y 0.54 μM cinetina) y de L. elegans (16.11 μM 2,4-diclorofenoxiacético y 16.11 μM cinetina) se cuantificaron los alcaloides totales, encontrándose concentraciones de 0.48 y 0.34 mg EATr g-1 biomasa, respectivamente. Con el análisis por cromatografía de gases se determinó la presencia de algunos alcaloides como lupanina, isolupanina, hidroxilupanina, pero en concentraciones trazas.