“Caracterización de la ultraestructura de la fibra muscular y asociación del perfil inmunológico con las características clínicas de los pacientes clasificados con miopatías inflamatorias idiopáticas”

Abstract

Antecedentes: las miopatías inflamatorias idiopáticas (MII) son un grupo heterogéneo de enfermedades autoinmunes que afectan a los músculos que presentan una serie de características clínicas, demográficas, histológicas e inmunopatológicas que permiten agruparlas en distintos subgrupos, sin embargo; el diagnóstico y clasificación de las MII permanecen complejos debido a la poca información disponible sobre la patogenia de la enfermedad, así como por la heterogeneidad y superposición de características de los subgrupos.El empleo de tecnologías como la Microscopia Electrónica de Barrido (MEB), permite un análisis histológico con mayor resolución para la apropiada caracterización de la fibra muscular de pacientes con MII, lo que, en conjunto con la detección de autoanticuerpos y la cuantificación de citocinas y quimiocinas, nos posibilita profundizar y comprender mejor la fisiopatología de la enfermedad. Objetivo: caracterizar la ultraestructura de la fibra muscular y asociar el perfil inmunológico con las características fisiopatológicas de los pacientes clasificados con MII. Material y Métodos: en este estudio transversal, se obtuvo biopsia muscular de doce pacientes clasificados con MII de acuerdo con los criterios EULAR/ACR 2017, de los cuales se logró caracterizar la ultraestructura de la fibra muscular de 10 pacientes. Se obtuvieron muestras de suero y músculo de cada paciente. Para la caracterización del perfil inmunológico se realizó la detección de autoanticuerpos (Ro-52, OJ, EJ, PL7, PL12, SRP, Jo-1, PMScl75, PMScl100, Ku, SAE1, NXP2, MDA5, TIF1γ, Mi-2α, Mi-2β) con el kit del inmunoensayo en línea Euroline: Autoimmune Inflammatory Myopathies de EUROIMMUN a PerkinElmer company, Medizinische Labordiagnostika; así como la cuantificación de citocinas (IL-1β, IFN-α2, IFN-γ, TNF-α, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-17A, IL-18, IL-23, IL-33) y quimiocinas (CCL2, CXCL8) mediante el kit para el ensayo multiplex basado en perlas LEGENDplexTM Multi-Analyte Flow Assay Kit de BioLegend®. El análisis histológico del músculo se realizó mediante la tinción hematoxilina-eosina mientras que la ultraestructura de la fibra muscular se caracterizó mediante MEB. Resultados: se observó que la estructura y la morfología de la fibra muscular se ve afectada de acuerdo con la disminución de la fuerza muscular y el aumento de enzimas musculares séricas. Se encontró diferencia en los niveles séricos de IL-6 de pacientes con MII con respecto a sujetos control (11.3 ± 7.69 vs 5.0 ± 4. 33, P = 0.028). Así mismo, se detectó diferencia en los niveles séricos de IFN-γ (12.1 ± 10.80 vs 1.7 ± 2.23 pg/mL, P = 0.048) y CCL2 (294.8 ± 85.11 vs 116.3 ± 66.41 pg/mL, P = 0.005) en pacientes seropositivos. Finalmente, de acuerdo con la asociación entre enzimas musculares, puntaje de MMT8, citocinas y anticuerpos, se observó correlación entre los niveles séricos de aldolasa y CXCL8 (rs = -0.929, P = 0.003) así como entre los niveles séricos de LDH e IFN-γ (rs = 0.692, P = 0.027), este último resultado también se vio reflejado en mayores niveles séricos de IFN-γ (16.9 ± 11.09 pg/mL, vs 2.2 ± 3.6, P = 0.018) en pacientes con niveles elevados de LDH, así como mayores niveles de LDH en pacientes seropositivos (289.4 ± 87.61 vs 168.8 ± 32.71 U/L, P = 0.031). Conclusión: la ultraestructura de la fibra muscular se observa con marcadas irregularidades, porosidades, disrupción de la linealidad e integridad del fascículo conforme los niveles séricos de enzimas musculares aumentan y la fuerza muscular de los pacientes disminuye. Así mismo, los niveles séricos de IFN-γ son mayores en pacientes con LDH fuera del rango normal mientras que los niveles séricos de LDH son mayores en pacientes seropositivos.