Producción y caracterización bioquímica de una enzima lipolítica recombinante proveniente de una arquea halófila, empleando a Haloferax volcanii como sistema de expresión.

Abstract

Actualmente, las enzimas comercialmente disponibles no son estables cuando son expuestas a condiciones de reacción extremas, tales como altas temperaturas, niveles altos o bajos de pH, altas concentraciones salinas, solventes orgánicos, etc. (1). En tales condiciones de reacción, las enzimas comerciales son irreversiblemente desnaturalizadas. Esta situación ha llevado a la investigación de microorganismos extremófilos, para entender los niveles de adaptación que han desarrollado, su supervivencia en condiciones extremas y también, estudiar las bases moleculares de la estabilidad de sus enzimas (2). Un grave conflicto que se ha encontrado en los estudios que involucran la producción de enzimas lipolíticas de arqueas halófilas nativas, es que su nivel de producción es extremadamente bajo en los cultivos. Debido a esta dificultad, la comunidad científica ha orientado sus esfuerzos de investigación, hacía la clonación y expresión de enzimas de microorganismos halófilos extremos, empleando técnicas de Biología Molecular. El huésped más usado en la producción de enzimas recombinantes es Escherichia coli; sin embargo, este huésped difícilmente se puede usar para la expresión de enzimas recombinantes de halófilos extremos, ya que éste no es microorganismo halófilo. Debido a que el citoplasma de E. coli carece de sal, el plegamiento de las proteínas recombinantes halofílicas es defectuoso y en la mayoría de las ocasiones, las proteínas son sintetizadas en masas proteínicas (cuerpos de inclusión); los cuales, generalmente, carecen de función catalítica.