DETERMINACION DE LA EXPRESIÓN GÉNICA DE MIELOPEROXIDASA POR APLICACION DE DIFERENTES FUERZAS ORTODÓNCICAS, MODELO ANIMAL

Abstract

La fuerza ortodóncica es definida como la fuerza aplicada al diente con el propósito de lograr movimiento efectivo. La aplicación de estas fuerzas ortodóncicas producen regiones de compresión y tensión en el ligamento periodontal lo cual provoca cambios en los tejidos dentales y paradentales, incluyendo: pulpa dental, ligamento periodontal, hueso alveolar, etc. Dichos tejidos, expuestos a diversos grados de magnitud, frecuencia y duración de cargas mecánicas, expresan cambios extensivos tanto macroscopicos como microscópicos. En el área de ortodoncia es fundamental mantener un correcto control de fuerzas, por lo que se ha buscado la manera de entender con mayor claridad la repercusión biológica de la aplicación de las mismas.

Objetivo general Evaluar la expresión génica de la MPO en un modelo animal experimental bajo diferentes magnitudes de fuerzas ortodóncicas. Objetivos específicos - Medir los niveles de mRNA del gen de MPO en tejido gingival sometido a diferentes fuerzas ortodóncicas. - Correlacionar la expresión génica de MPO en tejido gingival con cantidad de MPO evaluada por ELISA. - Correlacionar la expresión génica y proteica de MPO en tejido gingival con la fuerza ortodoncica aplicada.

Materiales y Métodos Animales Las ratas macho de la cepa Wistar necesarias fueron proporcionadas por el bioterio del Centro Universitario de Ciencias de la Salud, las cuales fuerón monitoreadas en cuanto a su desarrollo y peso, se inicio el procedimiento cuando las ratas alcanzaron un minimo de 150 grs de peso. Se coloco un abrebocas en la rata, el cual es una pinza de curación abierta por un tope colocado en la parte inferior de la misma y manteniendo su apertura con el abrebocas plastico; se sujeto la lengua y se realizo una rienda con un punto de sutura de hilo seda 000 con 3/8 de círculo con bordes cortantes para asegurarla, luego se limpio la zona de saliva con una minitorunda de algodón se coloco ácido fosfórico Etching Solution en 10cc Ormco/Sybron con un microbrush en la zona de molares e incisivos de la rata se limpió con agua y se volvió a secar con la mini torunda de algodón despues se coloco solución adhesiva de resina líquida OrthoSolo de 5ml de SDS/Ormco se fotocuro con la lámpara de fotocurado Oriblue y con una Jeringa con resina fotocurable en pasta EnLight 4grs Ormco se cementó la banda preajustada preorificada en los incisivos superiores y se fotocuro una vez mas, este procedimiento se realizo de la misma manera con el bracket modificado unido a una cadena y la ligadura con resina fotocurable en primer molar superior izquierdo, se verifico que estubiera bien asegurado. fue colocado en la zona molar de la rata en la superficie oclusal inferior de la rata y dejando asi el slot del bracket hacia el antagonista en el maxilar superior de la rata. Despues de esto se limpio con otra minitorunda de algodón para secar las molares del lado izquierdo.

resultados Se utilizó un análisis de t-Student para comparar los grupos de datos, los cuales no muestran variaciones significativas entre grupos. Esto lleva a concluir que el GAPDH es un gen constitutivo que puede emplearse en estas muestras. Para el anlisis de la expresion genica de MPO que es el gen de interes los valores se normalizan contra la expresion genica de un gen constitutivo, el cual tiene una expresion teorica constante en los tejidos. Se utilizó un análisis de ANOVA para comparar los grupos de datos, y no muestran variaciones significativas entre los grupos. Por lo que se concluye que no existe un aumento en la expresion genica de MPO como resultado de la fuerza ortodoncica aplicada.

CONCLUSIONES Con base en los resultados de este trabajo se realizan las siguientes conclusiones: • La medicion del mRNA de MPO fue factible en los animales de experimentación. • La aplicación de diferentes magnitudes de fuerza ortodoncica afecta la expresion del mRNA de MPO en tejido gingival, pero no significativamente. • La fuerza minima necesaria para lograr una activacion genica de MPO es de 1 oz. • No existe correlacion entre los niveles del mRNA de MPO en tejido gingival y los niveles de proteina evaluados en el LGC