Perfil de autoanticuerpos en artritis reumatoide y su asociación con factores genéticos e inmunológicos: KIR/HLA-I, HLA-DRB1*04, IFN-y, IL-15 e IL-21

Abstract

La artritis reumatoide (AR) es una enfermedad autoinmune, inflamatoria, crónica y sistémica caracterizada por el daño de la membrana sinovial, la producción de anticuerpos y de citocinas. La producción de anticuerpos anti-péptidos cíclicos citrulinados (anti-CCP), anti-vimentina citrulinada mutada (anti-MCV) y anti-peptidil arginina deiminasa 4 (anti-PADI4), además del factor reumatoide (FR), son también característicos de la AR, sin embargo, no todos los pacientes los presentan. Esta seropositividad o seronegatividad de la AR podría estar asociada con factores genéticos e inmunológicos. Dentro de los factores genéticos, se encuentra la familia de genes KIR (Killer immunoglobulin-like receptor) que codifican para receptores expresados sobre células NK y subpoblaciones de células T y reconocen como ligandos a moléculas HLA-I. La interacción KIR-HLA regula las funciones de las células NK y subpoblaciones de células T y puede generar respuestas celulares que influyan en la predisposición, riesgo o protección contra diferentes enfermedades autoinmunes, como la AR. Previamente se ha asociado KIR2DL2/2DS2 con susceptibilidad a AR. Además, uno de los factores genéticos más importantes descritos para el desarrollo y progresión de la AR, así como para la producción de autoanticuerpos contra proteínas citrulinadas es la presencia del HLA-DRB1*04. En relación a factores inmunológicos, se encuentra la producción de ciertas citocinas, tales como IFN- , IL-15 e IL-21, que intervienen en la retroalimentación del ambiente proinflamatorio y promueven la severidad del daño en la articulación. OBJETIVO GENERAL. Evaluar la asociación del perfil de autoanticuerpos en artritis reumatoide con factores genéticos e inmunológicos: KIR/HLA-I, HLA-DRB1*04, IFN-, IL-15 e IL-21 METODOLOGÍA. Se obtuvo muestra de sangre periférica de pacientes con AR (n=157) y de sujetos control, SC (n=80). Un médico reumatólogo evaluó la actividad clínica de los pacientes con AR por medio de los índices DAS28-VSG, CDAI y SDAI. El FR se cuantificó por turbidimetría; los niveles de anti-CCP, anti-MCV, anti-PADI4, IL-15, IL-21 e IFN- se cuantificaron por medio de kits de ELISA. Se genotipificaron 14 genes y 2 pseudogenes KIR mediante PCR-SSP, así como HLA-C1/C2, -Bw4. Se genotipificó el HLA-DRB1*04 por PCR de punto final y se identificaron los alelos por secuenciación de Sanger. El análisis estadístico se llevó a cabo con los programas informáticos Graphpad Prism 6 y SPSS 15.0. Se consideró un valor de p < 0.05 como estadísticamente significativo. RESULTADOS. Los niveles de FR, anti-CCP, anti-MCV y anti-PADI4 fueron más altos en sujetos con AR que en SC (mediana 63.8 vs 8.03 U/mL; 120.3 vs 2.2 U/mL; 519.2 vs 8.05 U/mL; 3.7 vs 2.6 ng/mL). El gen KIR2DL2 se encontró más frecuente en pacientes con AR que en SC (79% vs 58%, p = 0.0005, OR = 2.7, IC 95% = 1.5-4.6), así como también fue más frecuente en el genotipo compuesto con HLA-C1 (78% vs 59%, p = 0.0001, OR = 4.2, IC 95% = 1.7–10.3). Los individuos con genotipo KIR2DL2+/2DS2- presentan niveles mayores de anti-CCP en comparación a los portadores del genotipo KIR2DL2+/2DS2+ ( = 164 U/mL vs = 108 U/mL, p = 0.025). El gen HLA-DRB1*04 fue más frecuente en individuos con AR que en SC, así como el alelo HLA-DRB1*04*04. Los niveles de citocinas IFN-y (AR, = 35.8 U/mL; SC, = 12.2 U/mL, p = 0.04), IL-15 (AR, = 89.4 U/mL; SC, = 39.8 U/mL, p = 0.0001) e IL-21 (AR, = 231.3 U/mL; SC, = 23.2 U/mL, p = 0.0001) se encontraron elevados en individuos con AR. CONCLUSIONES. La determinación de FR, anti-CCP y anti-MCV sugiere un alto potencial como biomarcadores de AR, debido a su alta frecuencia, sensibilidad y especificidad. El gen KIR2DL2 en pacientes con AR, sugiere que puede tener un papel en la susceptibilidad a la enfermedad. Además, los individuos con AR portadores del genotipo KIR2DL2+/2DS2- mostraron mayores niveles de anti-CCP. El HLA-DRB1*04 se encontró en mayor proporción en AR, así como el alelo HLA-DRB1*04*04. Las citocinas IFN-y, IL-15 e IL-21 tuvieron niveles elevados en AR, en especial IL-21 se encontró elevada en individuos seropositivos a anti-CCP y anti-MCV. En conjunto, nuestros resultados sugieren que la triple seropositividad (FR/anti-CCP/anti-MCV) es frecuente en nuestra población y podría ser considerada dentro de los criterios de clasificación y seguimiento de AR, en conjunto con la determinación de IL-21 como biomarcadores. El KIR2DL2 y el HLA-DRB1*04*04 fueron más frecuentes en AR que en SC, por lo que estos podrían ser un factor genético importante para el desarrollo de AR.