Caracterización de bacteriófagos aislados de muestras de suelo con capacidad para infectar Agrobacterium tumefaciens

Abstract

Se llevó a cabo la obtención de muestras de suelo agrícola con la intención de aislar bacteriófagos que infecten A. tumefaciens. Seguidamente se propagaron y purificaron las partículas virales, se extrajo ADN de fago, se insertó en el vector pBluescript para su posterior secuenciación parcial. Se obtuvieron placas líticas con bordes delineados de un tamaño entre 3-5 mm, transparentes. Una concentración de ADN de fago estimada entre 15-20 ng/μL, pero sin mostrar degradación de éste ni contaminación con ARN. Después de la transformación genética de E. coli, resultaron clonas con inserto que se seleccionaron para extraer el ADN plasmídico, y éste se envió a secuenciar, mostrando similitud con ADN genómico bacteriano, debido a que la muestra no fue tratada previamente con enzimas para que degradaran el ADN bacteriano y por consecuencia se arrastró. En una segunda secuenciación, se mostró ruido en los resultados dado que al parecer el primer para secuenciación M13 se pegaba en otras zonas del plásmido