Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem:
https://hdl.handle.net/20.500.12104/104872Registro completo de metadatos
| Campo DC | Valor | Lengua/Idioma |
|---|---|---|
| dc.contributor.author | Méndez Clemente, Anibal Samael | |
| dc.date.accessioned | 2024-09-18T17:31:42Z | - |
| dc.date.available | 2024-09-18T17:31:42Z | - |
| dc.date.issued | 2022-05-09 | |
| dc.identifier.uri | https://wdg.biblio.udg.mx | |
| dc.identifier.uri | https://hdl.handle.net/20.500.12104/104872 | - |
| dc.description.abstract | Antecedentes: El cáncer de próstata (CPa) continúa siendo un importante problema de salud pública en el mundo; al momento del diagnóstico, un alto porcentaje de los pacientes se encuentran en etapas de progresión tardías, cuando las células infiltradas por el tumor ya han invadido el tejido adyacente. STAT-3, IL-6R y los niveles séricos de IL-6 se han asociado con la adquisición de capacidades migratorias, invasivas, clonogénicas y metastásicas de CPa. Varios estudios se han centrado en inhibir la vía STAT-3 en diferentes niveles con relativo éxito en el cáncer. Este es el primer estudio en el que Stattic (Stt), un inhibidor de STAT-3, se combina con Tocilizumab (Tcz), un anticuerpo contra IL-6R, son utilizados en un modelo de cáncer de próstata para inhibir el eje de señalización IL-6/IL-6R/STAT-3. Objetivo: En este estudio, se evaluó el efecto de la inhibición del eje de señalización IL-6/IL-6R/STAT-3 sobre la proliferación, clonogenicidad, migración e invasión en células metastásicas de cáncer de próstata. Metodología: se utilizaron in vitro las líneas celulares RWPE-1 (No tumoral), 22Rv1 (Tumor primario), LNCaP (Metastásica) y DU-145 (Metastásica independiente de andrógenos) para evaluar las citocinas, quimioquinas, factores de crecimiento, STAT-3, pSTAT-3, IL-6R, Vimentina y E-cadherina en las células. A continuación, evaluamos el efecto de la inhibición de STAT-3 (expresada constitutivamente en células DU-145) con Stt y/o Tcz sobre la expresión de Vimentina, VEGF, E-cadherina, así como en las capacidades proliferativas, clonogénicas, migratorias e invasivas en células de CPa metastásicas. Resultados: La expresión de IL-6, CXCL8, VEGF y Vimentina están particularmente aumentadas en las células de cáncer de próstata metastásico, así como sus capacidades proliferativas y migratorias. El tratamiento con Stt o Tcz disminuye la Vimentina y el VEGF, aumenta la expresión de E-cadherina e inhibe la capacidad proliferativa, clonogénica, migratoria e invasiva de las células DU-145, aunque la adición adicional de IL-6 disminuye su efecto inhibidor. Sin embargo, el tratamiento con Stt + Tcz mantiene la inhibición incluso con altas concentraciones de IL-6. Conclusión: Stt + Tcz disminuye la expresión de Vimentina, VEGF, incrementa la expresión de E-cadherina además, disminuye las capacidades proliferativas, clonogénicas, migratorias e invasivas de las células de cáncer de próstata metastásico. | |
| dc.description.tableofcontents | 2.1.La próstata y patologías asociadas .......................................................... 3 2.2.El cáncer de próstata ............................................................................... 4 2.3.Metástasis en cáncer de próstata............................................................. 7 2.4.Moléculas de transición implicadas en las capacidades migratorias e invasivas en cáncer................................................................................ 11 2.5.El sistema inmune y el cáncer................................................................ 12 2.6.Transductor de Señal y Activador de la Transcripción 3 (STAT-3)......... 13 2.7.El IL-6 y el receptor de IL-6 (IL-6R)........................................................ 16 2.8.Estudios recientes de STAT-3 en cáncer............................................... 18 3. JUSTIFICACIÓN................................................................................................. 20 4. HIPÓTESIS......................................................................................................... 20 5. OBJETIVOS........................................................................................................ 21 5.1.Objetivo General .................................................................................... 21 5.2.Objetivos particulares............................................................................. 21 6. METODOLOGÍA................................................................................................. 22 6.1.Diseño Metodológico.............................................................................. 22 6.2.Diagrama metodológico ......................................................................... 23 6.3.Modelo de estudio .................................................................................. 24 6.4.Metodologías.......................................................................................... 24 6.4.1. Cultivo de Líneas celulares ............................................................. 24 6.4.2. Obtención del sobrenadante ........................................................... 25 6.4.3. Condiciones experimentales ........................................................... 25 6.4.4. Bloqueo de IL-6R en células DU-145.............................................. 25 6.4.5. Determinación de citocinas y factores de crecimiento solubles en células de cáncer de próstata por citometría de flujo (método CBAs).... 25 6.4.6. Evaluación de la expresión a nivel proteína de Vimentina, E- cadherina, STAT-3 total y pSTAT-3 mediante Western Blot .................. 26 6.4.7. Determinación de niveles de secreción de VEGF (ELISA) ............. 27 6.4.8. Determinación de la fosforilación de STAT-3 por In-Cell Western (ICW)...................................................................................................... 27 6.4.9. Determinación de la migración por ensayo de cierre de herida ...... 28 Efecto de la inhibición del eje de señalización IL-6/IL-6R/STAT-3 sobre la proliferación, clonogenicidad, migración e invasión en células metastásicas de cáncer de próstata VI Méndez-Clemente AS, 2022 6.4.10. Determinación de la viabilidad celular por WST-1........................... 29 6.4.11. Determinación de la proliferación celular por XCELLigence ........... 29 6.4.12. Determinación de capacidad de la formación de colonias .............. 30 6.4.13. Evaluación de la invasión por quimiotaxis con matrigel .................. 30 6.4.14. Análisis estadístico.......................................................................... 31 6.4.15. Financiamiento................................................................................ 32 7. CONSIDERACIONES ÉTICAS........................................................................... 33 8. CONSIDERACIONES DE BIOSEGURIDAD ...................................................... 33 9. RESULTADOS ................................................................................................... 34 9.1.Incremento de IL-6 y VEGF en células de cáncer de próstata metastásico 34 9.2.Las células de cáncer de próstata metastásico expresan menor E cadherina y mayor Vimentina................................................................. 47 9.3.Las células DU-145 tiene mayor capacidad proliferativa........................ 49 9.4.Las células metastásicas de cáncer de próstata DU-145 presenta mayor capacidad de migración ......................................................................... 50 9.5.Stattic en concentraciones mayores a 5 μM disminuye la viabilidad de las líneas celulares metastásicas LNCaP y DU-145.................................... 50 9.6.La inhibición reversible de Stattic disminuye su efectividad a las 24 h... 52 9.7.Las células DU-145 metastásicas de cáncer de próstata secretan abundante IL-6, VEGF, y tiene una elevada capacidad de proliferación y migración................................................................................................ 54 9.8.Tocilizumab (Tcz) no afecta la viabilidad celular a concentraciones de 10,000 o menores ng/mL. ...................................................................... 56 9.9.La combinación de Stattic y Tocilizumab sobre STAT-3 produce inhibición de STAT-3 a las 24 h en las células DU-145.......................................... 56 9.10. Stt-Tcz reduce la expresión de Vimentina y aumenta la expresión de E-cadherina en células metastásicas de cáncer de próstata DU-145. ... 58 9.11. El bloqueo de la vía IL-6/IL-6R/STAT-3 induce una disminución en la proliferación de células DU-145 ............................................................. 58 9.12. Stattic + Tocilizumab reduce el número de colonias de las células metastásicas DU-145 ............................................................................. 60 9.13. Stattic-Tocilizumab disminuyen la capacidad migratoria e invasiva de las células DU-145 ................................................................................. 61 10. DISCUSIÓN ...................................................................................................... 65 11. CONCLUSIONES.............................................................................................. 73 Efecto de la inhibición del eje de señalización IL-6/IL-6R/STAT-3 sobre la proliferación, clonogenicidad, migración e invasión en células metastásicas de cáncer de próstata VII Méndez-Clemente AS, 2022 12. LIMITACIONES................................................................................................. 73 13. PERSPECTIVAS............................................................................................... 75 14. BIBLIOGRAFÍA: ................................................................................................ 76 15. ANEXOS: .......................................................................................................... 84 | |
| dc.format | application/PDF | |
| dc.language.iso | spa | |
| dc.publisher | Biblioteca Digital wdg.biblio | |
| dc.publisher | Universidad de Guadalajara | |
| dc.rights.uri | https://www.riudg.udg.mx/info/politicas.jsp | |
| dc.subject | Il-6/il- 6R/stat-3 | |
| dc.subject | Proliferacion | |
| dc.subject | Clonogenicidad | |
| dc.subject | Celulas Metastasicas | |
| dc.subject | Cancer De Prostata | |
| dc.title | Efecto de la inhibición del eje de señalización IL-6/IL- 6R/STAT-3 sobre la proliferación, clonogenicidad, migración e invasión en células metastásicas de cáncer de próstata | |
| dc.type | Tesis de Doctorado | |
| dc.rights.holder | Universidad de Guadalajara | |
| dc.rights.holder | Méndez Clemente, Anibal Samael | |
| dc.coverage | GUADALAJARA, JALISCO | |
| dc.type.conacyt | doctoralThesis | |
| dc.degree.name | DOCTORADO EN CIENCIAS BIOMEDICAS | |
| dc.degree.department | CUCS | |
| dc.degree.grantor | Universidad de Guadalajara | |
| dc.rights.access | openAccess | |
| dc.degree.creator | DOCTOR EN CIENCIAS BIOMEDICAS | |
| dc.contributor.director | Hernández Flores, Georgina | |
| dc.contributor.codirector | Ortiz Lazareno, Pablo Cesar | |
| Aparece en las colecciones: | CUCS | |
Ficheros en este ítem:
| Fichero | Tamaño | Formato | |
|---|---|---|---|
| DCUCS10249FT.pdf | 6.06 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |
Los ítems de RIUdeG están protegidos por copyright, con todos los derechos reservados, a menos que se indique lo contrario.