Análisis de la expresión de receptores de estrógeno y prolactina en células NK: efecto de 17β-estradiol y prolactina en la citotoxicidad mediada por células NK en cáncer cervicouterino

Abstract

El cáncer cervicouterino (CaCu) es la segunda neoplasia más común en mujeres en México. Más del 99 % de mujeres que tiene CaCu también presentan una infección por el Virus del Papiloma Humano (VPH). Además del VPH, existen otros factores como los hormonales que se relacionan con la aparición de CaCu. Dentro del

microambiente tumoral se encuentran la prolactina (PRL) y los estrógenos como 17β- estradiol (E2) cuyos niveles se encuentran elevados en CaCu. Por otro lado, se ha

demostrado que las células NK son capaces de eliminar a células tumorales en CaCu. Hacen faltan estudios para dilucidar con precisión la relación entre los efectos hormonales sobre las células NK. Objetivo. Evaluar la expresión de receptores estrógenos y prolactina en células NK y el efecto de E2 y PRL en la citotoxicidad mediada por células NK, así como la expresión de ligandos de NKGD2 en células derivadas de CaCu. Metodología. Se cultivaron células NKL, células derivadas de CaCu como HeLa (con VPH-18), SiHa (con VPH-16), C33A (sin VPH) y células HaCaT (queratinocitos no tumorigénicos). Los estímulos hormonales fueron realizados con E2 (10 nM) y PRL (200 ng/mL) durante 48 h. La expresión del receptor de prolactina (PRLR) y los receptores de estrógenos (ERα, ERβ y GPER) se evaluaron por western blot en células NKL. Los receptores de activación de células NK (NKG2D, NKp30, NKp44 y NKp46) se evaluaron mediante citometría de flujo. Además, en células derivadas de CaCu y HaCaT se evaluó la expresión de ligandos de NKG2D (MICA/B) en la membrana y también la forma soluble de MICA mediante citometría de flujo

y ensayo de ELISA, respectivamente. El ensayo de citotoxicidad se realizó mediante un co- cultivo entre las células NKL y las células K562. Los resultados se analizaron mediante la

prueba ANOVA. Resultados. Se demostró la presencia de receptores hormonales (ERα, ERβ, GPER y PRLR) en las células NKL. El estímulo con PRL disminuye la expresión de NKG2D en células NKL en comparación con las células basales y con E2. En estado basal, las células positivas a la infección por VPH (HeLa, SiHa) presentan mayor expresión de los ligandos MICA/B en membrana que las células con ausencia de VPH (C33A, HaCaT). Los estímulos con E2+PRL disminuyeron la expresión de MICA/B en células SiHa. Los estímulos hormonales disminuyeron la liberación de MICA soluble en la mayoría de las líneas celulares. E2 redujo los efectos citotóxicos de las células NKL, pero PRL ejerció efectos opuestos. Por otra parte, el estímulo conjunto de E2+PRL aumentó la citotoxicidad mediada por células NK al nivel en que lo hizo la PRL sola. Conclusiones. Las células NK expresan los receptores hormonales, tanto de estrógenos como de prolactina. Además, este es el primer reporte que indica la presencia del receptor GPER en células NK. Los datos obtenidos sugieren E2 y PRL controlan los mecanismos por los cuales las células NK y las células derivadas de CaCu median la respuesta citotóxica. Finalmente, ambas hormonas tienen un efecto antagónico sobre la citotoxicidad mediada por células NK.