Obtención de un fortificante bioactivo a partir de leche humana

Abstract

La leche humana (LH) como fuente de alimentación para neonatos proporciona componentes bioactivos, antimicrobianos e inmunomoduladores. La fortificación de la leche humana es una estrategia que representa una alternativa nutricional, para proporcionar los componentes necesarios que beneficien el crecimiento y desarrollo en neonatos prematuros. El objetivo de este trabajo fue obtener un fortificante con actividad biológica a partir de leche humana, para neonatos prematuros y pacientes con inmunodeficiencias. La recolección de muestras de leche se realizó de madres donantes bajo criterios de inclusión establecidos. Las muestras de leche se mezclaron para obtener un pool y se separó el suero por precipitación ácida para su posterior esterilización, liofilización y acondicionamiento. El análisis nutrimental de leche y suero en diferentes etapas del proceso se realizó con un analizador ultrasónico, demostrando que la proporción de los macronutrientes se mantuvo sin pérdida considerable durante todo el proceso, además de un análisis más detallado de proteínas bioactivas como lactoferrina y otros componentes con actividad biológica como el ácido ascórbico por HPLC, minerales y el monitoreo de metales tóxicos ICP-OES. Una vez caracterizados los componentes nutrimentales y bioactivos de la leche, se definió la concentración promedio del fortificante, se esterilizó y se acondicionó en bolsas de PET metalizado con s para el producto final. Se realizaron pruebas de citotoxicidad con células mononucleares de sangre periférica (PBMC) con la administración del fortificante en un intervalo de concentraciones de 1, 10, 100 y 1000 μg/mL, demostrando que no existe diferencia significativa en el porcentaje de viabilidad celular para las concentraciones evaluadas. Además, se evaluó la actividad biológica en cultivo celular mediante el ensayo de proliferación celular y estimulación de producción de IFN-γ y TNF-α, mostrando un efecto de regulación celular y una respuesta inmunológica de los PBMC en presencia del fortificante, así como un efecto de inhibición de formación de biofilm Obtención de un fortificante bioactivo a partir de leche humana. en cultivo con Pseudomonas aeruginosa a una concentración de 100 mg/mL del fortificante, interviniendo en uno de los mecanismos de patogenicidad más comunes de estos microorganismos. Las pruebas de control de calidad microbiológico se realizaron utilizando MC-Media pads, para verificar la seguridad y el cumplimiento de las especificaciones establecidas para el producto posterior al proceso. Finalmente se monitoreó la esterilidad del fortificante durante 2 semanas para 4 grupos de microorganismos indicadores: mesófilos aerobios, coliformes totales, mohos y levaduras y bacterias ácido lácticas, en condiciones de refrigeración y temperatura ambiente como condiciones de conservación del fortificante, para demostrar que el producto estuviera libre de contaminación microbiológica o crecimiento bacteriano; obteniendo así un producto con potencial actividad biológica para la fortificación de la alimentación de neonatos prematuros.