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https://hdl.handle.net/20.500.12104/91957
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Campo DC | Valor | Lengua/Idioma |
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dc.contributor.author | Avalos Navarro, Guadalupe | |
dc.date.accessioned | 2023-04-18T21:58:58Z | - |
dc.date.available | 2023-04-18T21:58:58Z | - |
dc.date.issued | 2016-04-26 | |
dc.identifier.uri | https://wdg.biblio.udg.mx | |
dc.identifier.uri | https://hdl.handle.net/20.500.12104/91957 | - |
dc.description.abstract | La mayoría de las investigaciones se han enfocado en el estudio del efecto biológico de los extractos crudos de o a las antraquinonas aisladas de Aloe vera. Sin embargo, pocos estudios se enfocan en el análisis de productos comerciales semi- o terminados elaborados de esta planta. Por lo cual, este trabajo se enfocó en la evaluación de la inocuidad de productos comerciales semi-terminados utilizados como suplementos alimenticios. Para ello se realizó una evaluación de la concentración de antronas y antraquinonas (aloína, aloeemodina y emodina), mediante CLAR así como el efecto antimicrobiano y citotóxico, con el fin de confirmar científicamente las propiedades biológicas de las muestras comerciales después de ser sometidas a procesos físicos, químicos y térmicos. Los principales resultados fueron; A) la secuencias obtenida presentó una similitud e identidad del 100% con A. vera (No. de acceso KC893746.1) y un 98% de cobertura. Por lo tanto todos los efectos analizados y detectados en este trabajo se atribuyeron a la planta Aloe vera; B) las antronas y antraquinonas detectadas en extractos crudos y muestras comerciales fueron aloína, aloe-emodina y emodina. En los extractos crudos (gel, corteza y gel-corteza); las concentraciones de los tres metabolitos fue mayor en la corteza: aloína con 1459 ± 0,01 µg/mL; aloe-emodina con 990 ± 0,30 µg/mL; y emodina con 8 ± 0,02 µg/mL. En las muestras comerciales aloína fue detectada en todas las muestras en un rango de 0,75- 1,37 µg/mL; aloe-emodina fue detectada en dos muestras (WLPD e ILP) con 0,67 y 0,37 respectivamente. C) los extractos crudos metanólicos y muestras comerciales no presentaron inhibición sobre ninguna de las bacterias utilizadas (bacterias Gram positivas y negativas); sin embargo, al evaluar los estándares comerciales emodina ocasionó una inhibición sobre Staphylococcus aureus a una concentración de 12,5 µg/mL, siendo el primer informe de actividad antimicrobiana. Finalmente, los efectos citotóxicos cuantificados de las 4 muestras comerciales, sobre la línea celular HeLa evidenció que dos de las muestras con elevada cantidad de fibra fueron citotóxicas a concentraciones 1x; éstas fueron centrifugadas y la citotoxicidad se redujo ligeramente en una de ellas (ILGF50) a 3x pero con la segunda (ILGF100) se mantuvo a 1x. Estos resultados sugieren un posible riesgo en la inocuidad de las muestras [(1) A. vera inner leaf dehydrated powder 200X (ILGF100), (2) A. vera inner leaf blend powder 200X (ILGF50], sin embargo, es necesario realizar más estudios citotóxicos para corroborar dichos resultados e iniciar con otros 2 estudios farmacológicos para evidenciar de manera más contundente los resultados del presente trabajo. Con respecto a los resultados con la línea celular Caco-2 se analizó las muestras WLPD e ILP las cuales causaron citotoxicidad en concentraciones elevadas 5 y 10x | |
dc.description.tableofcontents | ÍNDICE DE CONTENIDO RESUMEN.......................................................................................................................... ..1 1. INTRODUCCIÓN .................................................................................................................3 1.1 Generalidades de Aloe vera ................................................................................................ 3 1.2 Compuestos químicos principales de Aloe vera.......................................................................... 4 1.3 Estudios farmacológicos con células humanas .......................................................................... 5 1.4 Estudios farmacológicos en modelos murinos........................................................................... 6 1.5 Estudios farmacológicos en humano ..................................................................................... 8 1.6 A. vera en la industria...................................................................................................... 8 1.7 Estudios farmacológicos realizados a muestras comerciales de A. vera ........................................... 9 1.8 Alteraciones típicas metabólicas celulares............................................................................ 10 1.8.1 Apoptosis..................................................................................................................10 1.8.2 Necrosis...................................................................................................................11 1.9 Actividad antimicrobiana................................................................................................ 12 2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA......................................................................................,...14 3. JUSTIFICACIÓN...............................................................................................................14 4. OBJETIVOS ...................................................................................................................15 4.1 Objetivo general ......................................................................................................... 15 4.2 Objetivos específicos.................................................................................................... 15 5. MATERIALES Y MÉTODOS...................................................................................................16 5.1 Obtención de muestras................................................................................................. 16 5.2 Identificación molecular de la planta ............................................................................... 16 5.2.1 Extracción de ADNg a partir de tejido vegetal ...................................................................16 5.2.2 Amplificación de la región espaciadora interna transcrita 1-4 (Internal Transcribed Spacer [ITS])...........................................................................................................................17 5.2.3 Electroforesis..........................................................................................................19 5.2.4 Purificación del producto de la PCR...............................................................................19 5.2.5 Purificación con el Kit BigDye X-Terminator®....................................................................20 5.2.6 Reacción de secuenciación..........................................................................................20 5.3 Cuantificación de antronas y antraquinonas (aloína, aloe-emodina y emodina) en muestras comerciales y jugo crudo pasteurizado (Finisher) .................................................................................................... 21 6.3.1 Análisis cromatográfico de antronas y antraquinonas..........................................................21 5.3.2 Preparación de la curva de calibración con los estándares comerciales ...................................22 5.3.3 Preparación de los productos comerciales ......................................................................22 5.3.4 Preparación de los extractos crudos de la planta A. vera .....................................................22 5.4 Actividad antimicrobiana............................................................................................. 24 5.4.1 Cepas bacterianas utilizadas.......................................................................................24 5.4.2 Preparación del inóculo.............................................................................................25 5.4.3 Preparación (Estándares, Extractos y Muestras comerciales).................................................25 5.4.4 Análisis antimicrobiano por Kirby Bauer .........................................................................25 5.4.5 Susceptibilidad por microdilución ................................................................................25 5.5 Línea celular y condiciones de cultivo ............................................................................ 26 v 5.5.1 Viabilidad celular....................................................................................................26 5.5.1.1 WST-1 ..............................................................................................................27 5.5.1.2 NRU cualitativa ...................................................................................................27 5.5.1.3 NRU cuantitativa .................................................................................................27 5.5.2 Detección de necrosis..............................................................................................28 5.5.2.1 LDH.................................................................................................................28 5.5.2.2 Azul de tripano ..................................................................................................28 6. RESULTADOS ............................................................................................................29 6.1 Identificación molecular............................................................................................ 29 6.1.1 Electroforesis del ADNg ..........................................................................................29 6.1.2 Amplificación PCR.................................................................................................30 6.1.3 Árbol filogenético ................................................................................................31 6.2 Determinación de antronas y antraquinonas ...................................................................31 6.3 Actividad antimicrobiana..........................................................................................34 6.4 Efecto citotóxico de las muestras comerciales frente a las líneas celulares HeLa y Caco-2 .......... 36 6.4.1 Ensayos sobre la línea celular HeLa ..........................................................................36 6.4.2 Ensayos sobre la línea celular Caco-2........................................................................47 7. DISCUSIÓN............................................................................................................51 7.1 Identificación molecular......................................................................................... 51 7.2 Concentraciones de antronas y antraquinonas en extractos crudos metanólicos y muestras comerciales............................................................................................................ 51 vi 7.3 Actividad antimicrobiana....................................................................................... 54 7.4 Efectos citotóxicos.............................................................................................. 55 8. CONCLUSIONES ....................................................................................................58 9. BIBLIOGRAFÍA ......................................................................................................59 | |
dc.format | application/PDF | |
dc.language.iso | spa | |
dc.publisher | Biblioteca Digital wdg.biblio | |
dc.publisher | Universidad de Guadalajara | |
dc.rights.uri | https://www.riudg.udg.mx/info/politicas.jsp | |
dc.subject | Aloe Vera | |
dc.title | Citotoxicidad y actividad antimicrobiana de productos comerciales semi-terminados de Aloe vera | |
dc.type | Tesis de Maestría | |
dc.rights.holder | Universidad de Guadalajara | |
dc.rights.holder | Avalos Navarro, Guadalupe | |
dc.coverage | OCOTLAN, JALISCO | |
dc.type.conacyt | masterThesis | |
dc.degree.name | MAESTRIA EN CIENCIAS | |
dc.degree.department | CUCIENEGA | |
dc.degree.grantor | Universidad de Guadalajara | |
dc.rights.access | openAccess | |
dc.degree.creator | MAESTRO EN CIENCIAS | |
dc.contributor.director | López López, Zaira Del Rocío | |
dc.contributor.codirector | Rivera Sánchez, Gildardo | |
Aparece en las colecciones: | CUCIENEGA |
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