Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: https://hdl.handle.net/20.500.12104/90778
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dc.contributor.authorRhó Más, Fabián
dc.date.accessioned2022-09-12T19:47:34Z-
dc.date.available2022-09-12T19:47:34Z-
dc.date.issued2022-07-08
dc.identifier.urihttps://wdg.biblio.udg.mx
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/20.500.12104/90778-
dc.description.abstractResumen Introducción. Desde el siglo pasado el uso de antibióticos ha sido el principal tratamiento contra las infecciones bacterianas, sin embargo, actualmente se ha reportado un número creciente de infecciones generadas por bacterias multirresistentes a los antibióticos, lo cual genera una gran preocupación a nivel global. Las bacterias producen sustancias con actividad antimicrobiana, puesto que compiten por recursos contra bacterias de diferentes grupos filogenéticos. Se ha reportado que las bacterias asosiadas a la piel de anfibios son productoras de péptidos antimicrobianos (AMPs por sus siglas en inglés) y son muy importantes en evitar y combatir infecciones bacterianas. Objetivo. Determinar la actividad antimicrobiana y el efecto antitumoral de sustancias bioactivas producidas por bacterias asociadas a la piel de los anfibios endémicos de México Ambystoma flavipiperatum y Lithobates psilonota. Materiales y métodos. Se indujo un estrés competitivo en bacterias problema (Serratia fonticola, Bacillus cereus y Pantoea septica [bacterias aisladas de anfibios endémicos de México]) por medio de cámaras de cocultivo, contra Escherichia coli y Staphylococcus aureus. Se concentraron las proteínas extracelulares de las bacterias problema y se realizaron ensayos antimicrobianos en microplaca contra E.coli y S.aureus. También se realizaron pruebas de citotoxicidad en las líneas celulares MRC-5 y HeLa. Resultados. Las proteínas concentradas de las bacterias problema produjeron una importante inhibición en el crecimiento de E.coli y S.aureus cuando se usaron concentraciones de 4,000 μg/mL y 2,500 μg/mL. De forma muy parecida, se encontró una fuerte inhibición en la viabilidad celular de MRC-5 y de HeLa con las concentraciones antes mencionadas. Conclusiones. Las bacterias Serratia fonticola, Bacillus cereus y Pantoea septica (asosiadas a la piel de anfibios endémicos de México) generan sustancias bioactivas con propiedades antimicrobianas. Dichas sustancias también tienen efectos citotóxicos contra MRC-5 y HeLa
dc.description.tableofcontentsÍndice Dedicatoria ....................................................................................................................................... I Agradecimientos ............................................................................................................................. II Índice............................................................................................................................................. III Resumen .......................................................................................................................................... 1 Abstract ........................................................................................................................................... 2 Introducción .................................................................................................................................... 3 Antecedentes ................................................................................................................................... 5 Péptidos antimicrobianos (AMP) ................................................................................................ 6 Mecanismos de acción de los péptidos antimicrobianos ........................................................... 11 Péptidos antitumorales .............................................................................................................. 11 Producción de sustancias bioactivas por medio de competencia bacteriana ............................. 12 Justificación .................................................................................................................................. 14 Hipótesis ....................................................................................................................................... 15 Objetivos ....................................................................................................................................... 16 Objetivo general ........................................................................................................................ 16 Objetivos particulares ................................................................................................................ 16 Materiales y métodos .................................................................................................................... 17 Obtención de las cepas bacterianas ........................................................................................... 17 Pruebas de actividad antagónica mediante el uso de cocultivos bacterianos ............................ 17 Cuantificación preliminar y concentración de proteínas obtenidas de los cocultivos............... 20 Ensayos antimicrobianos en microplaca ................................................................................... 23 Pruebas de citotoxicidad en líneas celulares ............................................................................. 24 Cultivo y crecimiento de las líneas celulares ............................................................................ 24 Índice IV Ensayos de viabilidad celular en líneas celulares tumorigénicas y no tumorigénicas .............. 25 Análisis estadísticos ............................................................................................................. 26 Resultados ..................................................................................................................................... 28 Pruebas de actividad antagónica en cocultivos ......................................................................... 28 Serratia fonticola ................................................................................................................... 28 Bacillus cereus ....................................................................................................................... 29 Pantoea septica...................................................................................................................... 29 Cuantificación de proteínas ....................................................................................................... 30 Bioensayos antibacterianos con concentrados proteicos ........................................................... 30 S. fonticola vs bacterias indicadoras (E. coli y S. aureus) ................................................ 31 B. cereus vs bacterias indicadoras (E. coli y S. aureus) ........................................................ 32 P. septica vs Bacterias indicadoras (E. coli y S. aureus) ....................................................... 34 Ensayo de viabilidad celular en líneas celulares ................................................................... 36 Ensayo de viabilidad de línea celular MRC-5 ........................................................................... 37 Bioensayos línea celular HeLa .................................................................................................. 41 Discusión....................................................................................................................................... 47 Conclusiones ................................................................................................................................. 55 Referencias bibliográficas consultadas ......................................................................................... 56 Anexo 1 ......................................................................................................................................... 64 Cocultivos de todas las bacterias analizadas ............................................................................. 64 Cuantificación de proteína de los Extractos primarios.............................................................. 67 Actividad antagónica en cocultivos........................................................................................... 68 Ensayo de viabilidad celular en líneas celulares ....................................................................... 72
dc.formatapplication/PDF
dc.language.isospa
dc.publisherBiblioteca Digital wdg.biblio
dc.publisherUniversidad de Guadalajara
dc.rights.urihttps://www.riudg.udg.mx/info/politicas.jsp
dc.subjectBioactivas
dc.subjectBacterias
dc.subjectPiel
dc.subjectanfibios
dc.subjectEndemicos
dc.subjectMexico Ambystoma Flavipiperatum Y Lithobates Psilonota
dc.titleSustancias bioactivas producidas por bacterias asociadas a la piel de anfibios endémicos de México (Ambystoma flavipiperatum y Lithobates psilonota)
dc.typeTesis de Maestría
dc.rights.holderUniversidad de Guadalajara
dc.rights.holderRhó Más, Fabián
dc.coverageZAPOPAN JALISCO
dc.type.conacytmasterThesis
dc.degree.nameMAESTRIA EN CIENCIAS EN BIOSISTEMATICA Y MANEJO DE RECURSOS NATURALES Y AGRICOLAS
dc.degree.departmentCUCBA
dc.degree.grantorUniversidad de Guadalajara
dc.rights.accessopenAccess
dc.degree.creatorMAESTRO EN CIENCIAS EN BIOSISTEMATICA Y MANEJO DE RECURSOS NATURALES Y AGRICOLAS
dc.contributor.directorDiaz Perez, Leopoldo
dc.contributor.codirectorJimenez Perez, Mirian Irene
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