Interacción entre 17β-estradiol, prolactina y el Virus de Papiloma Humano sobre la modulación de los oncogenes, los receptores hormonales, el metabolismo y la producción de citocinas en un modelo de queratinocitos

Abstract

Los virus del papiloma humano (VPH) 16 y 18 son los tipos más frecuentes involucrados con el desarrollo del cáncer cervicouterino (CaCu) y su potencial oncogénico se atribuye fundamentalmente a la acción de los oncogenes E6 y E7. Sin embargo, la infección necesita de otros cofactores para desarrollar este tipo de tumor, tales como los hormonales. Se ha visto que los receptores estrógenos y prolactina se sobreexpresan conforme avanza esta enfermedad. El objetivo de este trabajo fue determinar si prolactina y 17β-estradiol modulan la expresión de los oncogenes, y a su vez si los oncogenes regulan la expresión del REα, REβ y PRLR, así como evaluar el efecto de ambos en la modulación del metabolismo y la expresión de citocinas en un modelo de queratinocitos transducidos con los oncogenes E6 o E7 de los VPH16 y 18. Por otro lado resultados preliminares del perfil de citocinas nos hicieron hipotetizar que los oncogenes en colaboración con las hormonas inducen una polarización protumoral en neutrófilos, una de las características de estos es que tienen un metabolismo acelerado por lo que nos pareció interesante medir los cambios en su metabolismo inducidos por el estímulo con sobrenadantes de las líneas celulares transducidas con los oncogenes. Métodos: La expresión de los oncogenes E6 y E7 fue evaluada por qPCR en las líneas celulares HeLa y SiHa estimuladas con 17β-estradiol o Prolactina; la expresión y localización de los receptores hormonales se evaluó mediante Western Blot e inmunofluorescencia en la línea celular HaCaT transducida con los oncogenes E6 o E7 del VPH16 y 18; el metabolismo celular se midió mediante MTT en el modelo de queratinocitos transducidos y neutrófilos de sangre periférica; las citocinas se cuantificaron mediante ELISA MULTIPLEX únicamente en células HaCaT transducidas con los oncogenes del VPH16. Resultados: Estradiol y PRL aumentan la expresión a nivel de mRNA de los oncogenes E6 y E7 en células HeLa y SiHa. Ambos oncogenes de los VPH16 y 18 aumentaron la expresión del REα y PRLR, por otro lado, el REβ solo fue regulado positivamente por el oncogén E6. Además, algunos de estos oncogenes modifican la ubicación de PRLR hacia el citoplasma y los receptores de estrógenos principalmente al núcleo. Ambas hormonas elevaron el metabolismo celular en las células HaCaT transducidas con E6 del VPH18 y E7 del VPH16; por último, E6 y E7 aumentan la producción de G-CSF, IL-7 e IL-8 en células HaCaT transducidas con los oncogenes del VPH16. El estímulo con sobrenadantes de las líneas celulares transducidas moduló el metabolismo en neutrófilos. Conclusión: Los resultados sugieren que la regulación mutua entre E, PRL y oncogenes de VPH podría cooperar con el proceso de carcinogénesis en CaCu.