Efecto de la prolactina autocrina de 60 kDa producida por las células de cáncer cérvico uterino sobre las vías de señalización implicadas en la inhibición de la apoptosis y modulación de la respuesta inflamatoria

Abstract

Introducción: La prolactina (PRL) es una hormona importante en procesos de reproducción, desarrollo, proliferación y diferenciación celular. Posterior a la unión con su receptor, se activan diferentes vías de señalización como Jak-STAT, MAPK y PI3K, importantes en la supervivencia celular y proliferación. La PRL se ha asociado con el desarrollo de diferentes tipos de cáncer, entre estos el cáncer cervicouterino. Existe una isoforma de PRL de 60 kDa producida por células de cáncer cervicouterino, de la cual no se ha evaluado su efecto en proliferación y apoptosis, ni en la modulación de la respuesta inmune. Objetivo: Evaluar el efecto de la PRL de 60 kDa en la activación de las vías de señalización asociadas a proliferación y supervivencia celular, así como su efecto en la proliferación celular, apoptosis y respuesta inmunológica. Metodología: Las líneas celulares derivadas de cáncer cervicouterino HeLa, SiHa y C33-A fueron estímuladas con PRL recombinante. Los ensayos de inhibición de las vías de señalización fueron realizados con el inhibidor específico AG490. La expresión de p-STAT3, p-AKT, p-ERK y p-p38, así como de las proteínas antiapoptóticas Bcl-xl, Bcl-2, Mcl-1 y survivina se llevó a cabo a través de western blot. El aislamiento de la PRL autocrina de 60 kDa se llevó a cabo por inmunoprecipitación con perlas magnéticas y su bioactividad fue probada con ensayos de proliferación con células Nb2. Se realizaron ensayos de TUNEL para evaluar la apoptosis. Se estimularon macrófagos THP-1 con la PRL autocrina de 60 kDa y las citocinas IL-1β, IL-12, TNF-α, IFN-γ e IL-10 fueron medidas a través de un ensayo de ELISA multiplex. Resultados: Se observó un incremento significativo en la activación de STAT-3, así como la expresión de las proteínas antiapoptóticas tras el estímulo con PRL recombinante. Se observó una disminución de la apoptosis en respuesta a PRL recombinante, efecto que se vió abatido tras el bloqueo de la vía Jak-STAT. La PRL autocrina de 60 kDa mostró ser bioactiva y tener capacidad de reducir la apoptosis de células derivadas de CaCu. Asimismo, esta variante indujo la producción de IL-1β y TNF-α por los macrófagos THP-1. Conclusiones: STAT3 es un factor de transcripción importante para llevar a cabo los efectos antiapoptóticos de la PRL recombinante en células de CaCu. La PRL producida por células de CaCu es bioactiva y tiene efectos antiapoptóticos en células de CaCu que pudieran ser mediados a través de STAT3.