EL ÁCIDO URSÓLICO DISMINUYE EL PROCESO INFLAMATORIO Y MEJORA LA VÍA DE SEÑALIZACIÓN DE LA INSULINA EN ADIPOCITOS 3T3-L1 ESTIMULADOS CON TNF-α

Abstract

En la Obesidad, la inflamación de bajo-grado y los cambios sobre la vía de señalización de la insulina en el tejido adiposo mediado por el factor de Necrosis Tumoral alfa (TNF-α), han sido relacionados con el desarrollo de resistencia a la insulina y diabetes mellitus tipo 2 (DM2). El fitofármaco Ácido ursólico (AU) ha demostrado eficacia en la prevención y el tratamiento de enfermedades inflamatorias y metabólicas, así como beneficio sobre la sensibilidad a la Insulina. Objetivo: En el presente estudio, se investigó la actividad que ejerce el AU sobre las adipocitocinas IL-6, MCP-1, adiponectina y las proteínas IRS-1 y Akt de la vía de señalización de la Insulina en adipocitos 3T3-L1 estimulados con TNF-α. Métodos: Los pre-adipocitos 3T3-L1 fueron inducidos a diferenciarse en adipocitos maduros y se mantuvieron así por 7 días para incrementar la acumulación de triglicéridos (TAG). Posteriormente, se añadieron al medio de cultivo 10 ng/ml TNF-α y diferentes concentraciones de AU durante 2 h y 24 h, respectivamente. Se realizó ensayo colorimétrico con MTT para evaluar la viabilidad celular después de 72 h con diferentes concentraciones de AU. Se utilizó Western Blot (WB) para determinar la concentración y fosforilación de las proteínas involucradas en la vía de señalización de la Insulina (Akt 1/2/3, Akt pT308, Akt pS473, IRS-1, IRS-1 pY612 e IRS-1 pS307). La secreción de IL-6, MCP-1 y adiponectina se midieron en el sobrenadante de los cultivos celulares mediante ELISA. Resultados: El tratamiento con TNF-α por 24 h afectó la activación de la vía de señalización de la insulina, disminuyendo la concentración de Akt 1/2/3 y de IRS-1, al mismo tiempo disminuyó la fosforilación en sus sitios de activación: IRS-1 pY612, Akt pS473 Y Akt pT308. Por otro lado, TNF-α incrementó la fosforilación de IRS-1 en pS307, provocando la interrupción de la vía de señalización de la insulina; sin embargo, se observó que el AU inhibió significativamente este efecto. Además, la secreción de adiponectina disminuyó después de 24 h de exposición a TNF-α, mientras que las adipocitocinas pro-inflamatorias IL-6 y MCP1 se incrementaron 6 y 45 veces, respectivamente comparadas con el grupo control. Interesantemente, este fenómeno se revirtió de manera significativa por el AU, mejorando la secreción de adipocitocinas casi a niveles fisiológicos. Conclusiones: Nuestros resultados sugieren que el AU contrarresta los cambios inducidos por TNF-α sobre la vía de señalización de la Insulina y atenúa el proceso inflamatorio al disminuir la secreción de IL-6, MCP-1, además de que mejora la secreción de adiponectina. Debido a estos hallazgos, el AU se sugiere como una molécula capaz de contribuir a prevenir el desarrollo de resistencia a la insulina en el adipocito.