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https://hdl.handle.net/20.500.12104/80611
Registro completo de metadatos
Campo DC | Valor | Lengua/Idioma |
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dc.contributor.advisor | Puebla Pérez, Ana María | |
dc.contributor.advisor | Delgado Saucedo, Jorge Iván | |
dc.contributor.author | Orozco Ceja, Vanessa | |
dc.date.accessioned | 2020-04-05T22:59:57Z | - |
dc.date.available | 2020-04-05T22:59:57Z | - |
dc.date.issued | 2017 | |
dc.identifier.uri | https://hdl.handle.net/20.500.12104/80611 | - |
dc.identifier.uri | http://wdg.biblio.udg.mx | |
dc.description.abstract | INTRODUCCIÓN. Los triterpenoides son metabolitos sintetizados por las plantas mediante la ciclación del escualeno, y son ampliamente usados en la medicina asiática por sus propiedades antiinflamatorias y antitumorigénicas (Liby, 2007). En la medicina tradicional mexicana, la corteza, resina y hojas de especies de la familia Burseraceae son utilizadas fundamentalmente para curar la fiebre, el dolor, las heridas y en el tratamiento contra el cáncer (Monroy-Ortiz, 2006). A partir de la resina de Bursera copa/Jifera se aislaron los triterpenoides de tipo ursano: a- am irina y acetato de a-amirina. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto antiinflamatorio que presentan estos triterpenoides mediante la inhibición de la liberación de los mediadores inflamatorios: IL-113, IL-6, TNF-a y NO en la línea celular ATCC RAW 264.7 estimulados con LPS. La a-amirina [50 ?M] inhibió las interleucinas IL-113, IL-6 y NO; no hubo diferencia en la viabilidad cuando se le comparó con indometacina; sin embargo, no inhibió a TNF-a. El acetato de a- amirina inhibió las interleucinas IL-113, IL-6, NO y, a [1 ?M], inhibió a TNF-a. Con respecto a indometacina [50 ?M], tuvo mayor inhibición de IL-6 y NO; no se observó diferencia en la viabilidad ni en la inhibición de IL-113. En conclusión, el acetato de a-amirina es la molécula con mayor potencial antiinflamatorio y la concentración óptima es 50 ?M, elegible para ensayo de inflamación inducida in vivo. | |
dc.description.tableofcontents | ÍNDICE ABREVIATURAS Y SÍMBOLOS ............................................................................................................. 11 INTRODUCCIÓN ................................................................................................................................. 13 l. ANTECEDENTES .............................................................................................................................. 14 1.1. INFLAMACIÓN ........................................................................................................................ 14 1.1.2. MEDIADORES BIOLÓGICOS EN INFLAMACIÓN .................................................................... 15 1.1.2. CITOCINAS ....................................................................................................................... 16 1.1.2.1. lnterleucina l. .......................................................................................................... 17 1.1.2.2. Factor de necrosis tumoral alfa (TNF-a) .................................................................. 17 1.1.2.3. lnterleucina 6 ........................................................................................................... 18 1.1.3. ÓXIDO NÍTRICO ................................................................................................................ 18 1.1.4. PARTICIPACIÓN DE LOS MACRÓFAGOS EN LA INFLAMACIÓN ........................................ 19 1.1.5. MODELO DE INFLAMACIÓN INDUCIDA POR LIPOPOLISACÁRIDO (LPS) Y PRODUCTOS BACTERIANOS ............................................................................................................................ 20 1.2. FAMILIA BURSERACEAE .......................................................................................................... 22 1.2.1. GÉNERO BURSERACEAE ................................................................................................... 22 1.2.2. DESCRIPCIÓN TAXONÓMICA DE LA ESPECIE Bursera copal/ifera .................................... 24 1.2.2.1. DESCRIPCIÓN GENERAL Y DISTRIBUCIÓN DEL ÁRBOL. ............................................. 24 1.2.2.2. HÁBITAT Y FENOLOGÍA ............................................................................................. 25 1.3. TERPENOIDES ......................................................................................................................... 27 1.3.1. TRITERPENOIDES ............................................................................................................. 29 1.3.1.1. USO DE TRITERPENOIDES COMO ANTI INFLAMATORIOS ......................................... 30 1.3.1.2. URSANOS .................................................................................................................. 31 1.3.1.3. ÁCIDO URSÓLICO ...................................................................................................... 32 1.3.1.4. a-amirina y acetato de a-amirina ............................................................................ 33 11. JUSTIFICACIÓN ............................................................................................................................... 36 111. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ............................................................................................... 37 IV. HIPÓTESIS ..................................................................................................................................... 38 V. OBJETIVOS ..................................................................................................................................... 39 5.1. OBJETIVO GENERAL. ............................................................................................................... 39 5.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS ......................................................................................................... 39 Triterpenoides de tipo ursa no obtenidos de Bursera copallifera y su efecto inhibidor de citocinas pro inflamatorias en macrófagos RA W 264. 7 VI. METODOLOGÍA ............................................................................................................................ 40 6.1. DISEÑO EXPERIMENTAL ......................................................................................................... 40 6.1.1. DESCRIPCIÓN GENERAL DEL ESTUDIO ............................................................................. 41 6.2. MATERIALES ........................................................................................................................... 42 6.2.1. TRITERPENOIDES DE TIPO URSANO a-amirina Y ACETATO DE a-amirina ....................... 42 6.3. ESTANDARIZACIÓN DE CULTIVO CELULAR ............................................................................. 43 6.3.1. LÍNEA CELULAR RAW 264.7 ............................................................................................. 44 6.3.1.1. EXPANSIÓN CLONAL DE LA LÍNEA CELULAR RAW 264.7 .......................................... 44 6.3.2. ESTANDARIZACIÓN DE LA CANTIDAD DE CÉLULAS POR POZO Y CONCENTRACIÓN DE LPS PARA ESTÍMULO CELULAR ......................................................................................................... 48 6.3.3. ESTANDARIZACIÓN DEL TIEMPO DE ESTÍMULO CELULAR .............................................. 49 6.3.4. ESTANDARIZACIÓN CON ÁCIDO URSÓLICO COMO TRITERPENOIDE DE TIPO URSANO DE REFERENCIA ............................................................................................................................... 49 6.4. EVALUACIÓN DE LA INHIBICIÓN DE LA LIBERACIÓN DE CITOCINAS PRO-INFLAMATORIAS Y ÓXIDO NÍTRICO EN EL SOBRENADANTE CELULAR CON LOS TRITERPENOIDES a-AMIRINA Y ACETATO DE a-AMIRINA ............................................................................................................... 52 VII. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ......................................................................................................... 56 7.1. ESTANDARIZACIÓN DEL CULTIVO CELULAR ........................................................................... 57 7.1.1. ESTRATEGIAS PARA LA DETERMINACIÓN DE LA CANTIDAD DE CÉLULAS POR POZO, LA CONCENTRACIÓN Y EL TIEMPO DE ESTÍMULO CELULAR CON LPS ........................................... 57 7.1.2. ESTANDARIZACIÓN CON ÁCIDO URSÓLICO (UA) COMO TRITERPENOIDE DE TIPO URSANO DE REFERENCIA .......................................................................................................... 60 7.2. EVALUACIÓN DE LA INHIBICIÓN DE LA LIBERACIÓN DE CITOCINAS PRO-INFLAMATORIAS Y ÓXIDO NÍTRICO EN EL SOBRENADANTE CELULAR CON LOS TRITERPENOIDES a-AMIRINA Y ACETATO DE a-AMIRINA ............................................................................................................... 65 7.2.1. VIABILIDAD CELULAR ....................................................................................................... 65 7.2.2. EVALUACIÓN DE LA INHIBICIÓN DE INTERLEUCINA 1~ (IL-1~) ....................................... 67 7.2.3. EVALUACIÓN DE LA INHIBICIÓN DEL FACTOR DE NECROSIS TUMORAL ALPHA (TNF-a) 70 7.2.4. EVALUACIÓN DE LA INHIBICIÓN DE INTERLEUCINA 6 (IL-6) ............................................ 73 7.2.5. EVALUACIÓN DE LA INHIBICIÓN DEL ÓXIDO NÍTRICO (NO) ............................................ 76 VIII. CONCLUSIONES .......................................................................................................................... 82 IX. PERSPECTIVAS Y LIMITACIONES ................................................................................................... 83 APÉNDICE 1 ....................................................................................................................................... 84 Triterpenoides de tipo ursa no obtenidos de Bursera copallifera y su efecto inhibidor de citocinas pro inflamatorias en macrófagos RA W 264. 7 l. PREPARACIÓN DE MEDIO DE CULTIVO Y SUERO FETAL BOVINO (FBS) ................................. 84 1.1. lnactivación del suero fetal bovino por calor: ................................................................ 84 1.2. Preparación del medio de cultivo suplementado: ......................................................... 84 2. SOLUBILIZACIÓN DE LPS ........................................................................................................ 84 3. DESCONGELAMIENTO, PASAJE, RASPADO MECÁNICO Y CONTEO CELULAR ........................ 85 3.1. DESCONGELAMIENTO DE LAS CÉLULAS EN CRIOPRESERVACIÓN .................................. 85 3.2. PASAJE, RASPADO MECÁNICO Y CONTEO CELULAR ...................................................... 86 Bibliografía ........................................................................................................................................ 88 | |
dc.format | application/PDF | |
dc.language.iso | spa | - |
dc.publisher | Biblioteca Digital wdg.biblio | |
dc.publisher | Universidad de Guadalajara | |
dc.rights.uri | https://wdg.biblio.udg.mx/politicasdepublicacion.php | |
dc.title | Triterpenoides de tipo ursano obtenidos de Bursera copallifera y su efecto inhibidor de citocinas proinflamatorias en macrófagos RAW 264.7 | |
dc.type | Tesis de Maestria | |
dc.rights.holder | Universidad de Guadalajara | |
dc.rights.holder | Orozco Ceja, Vanessa | |
dc.coverage | Guadalajara, Jalisco | |
dc.type.conacyt | masterThesis | - |
dc.degree.name | MAESTRIA EN CIENCIAS EN QUÍMICA | - |
dc.degree.department | CUCEI | - |
dc.degree.grantor | Universidad de Guadalajara | - |
dc.degree.creator | MAESTRA EN CIENCIAS EN QUÍMICA | - |
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