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https://hdl.handle.net/20.500.12104/110318Registro completo de metadatos
| Campo DC | Valor | Lengua/Idioma |
|---|---|---|
| dc.contributor.advisor | Ramírez Pelayo, Ana Sofía | |
| dc.contributor.advisor | Balcázar López, Edgar | |
| dc.contributor.author | Velázquez López, Yazmin Jeanette | |
| dc.date.accessioned | 2025-09-09T20:59:33Z | - |
| dc.date.available | 2025-09-09T20:59:33Z | - |
| dc.date.issued | 2024-08-08 | |
| dc.identifier.uri | https://wdg.biblio.udg.mx | |
| dc.identifier.uri | https://hdl.handle.net/20.500.12104/110318 | - |
| dc.description.abstract | El alcance de esta investigación consiste en el diseño y construcción de los plásmidos en E.coli, dos para la expresión de la fusión de CPS-1 con las proteínas fluorescentes mTurquoise2 (mTq2) y mNeonGreen (mNG), respectivamente, y otro adicional para la expresión heteróloga de cps1 (CNAG_04320) de C. neoformans, en S. cerevisiae. La generación de este sistema de plásmidos permitiría verificar mediante el FRET, la oligomerización potencial de Cn-CPS1, produciendo avances en el área de la investigación básica de síntesis de HA en hongos. | |
| dc.description.tableofcontents | Dictamen .......................................................................................................................... 3 Comprobante académico ....................................................................................................... 4 Autorización de impresión por el director ............................................................................ 7 RESUMEN ............................................................................................................................. 8 Agradecimientos y dedicatorias ............................................................................................. 11 Lista de figuras .................................................................................................................... 12 Lista de Tablas .................................................................................................................... 14 Glosario de abreviaturas ................................................................................................... 15 Glosario de términos y siglas ................................................................................................. 17 Contenido de la tesis ........................................................................................................... 18 INTRODUCCIÓN .................................................................................................................... 20 ANTECEDENTES .................................................................................................................. 22 1. Cryptococcus neoformans .................................................................................................. 23 2. La biosíntesis de HA ......................................................................................................... 24 3. Diversidad de los mecanismos de reacción de las HAS ................................................................ 25 4. Bacterias ....................................................................................................................... 27 5. Virus ............................................................................................................................. 27 6. Vertebrados ................................................................................................................. 28 7. Particularidades entre isómeros HAS de vertebrados .................................................................. 28 8. CPS1, la sintasa de ácido hialurónico de Cryptococcus neoformans ........................................ 29 9. El uso de FRET y las interacciones oligoméricas de la Cn-CPS1 ............................................... 29 JUSTIFICACIÓN ................................................................................................................... 34 HIPÓTESIS ........................................................................................................................ 35 OBJETIVOS ......................................................................................................................... 35 Objetivo general .................................................................................................................... 35 Objetivos específicos ............................................................................................................... 35 METODOLOGÍA .................................................................................................................... 36 1. Cepas ............................................................................................................................ 36 2. Medios de cultivo Luria-Bertani (LB) .................................................................................... 36 3. Métodos moleculares generales ......................................................................................... 36 4. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) ............................................................................. 36 5. Reacciones de restricción enzimática ..................................................................................... 37 6. Electroforesis en geles de agarosa .......................................................................................... 38 7. Extracción de ADN de gel ................................................................................................... 38 8. Ensamblado de Gibson ...................................................................................................... 39 9. Clonación de Cn-cps1 y construcción de plásmidos ....................................................................... 39 Clonación de Cn-cps1. ............................................................................................................... 39 Construcción del plásmido MpYES2-7::Cn-cps1::v5 ....................................................................... 40 Construcción del ensamble Cn-cps1::6xhis::mNG .......................................................................... 41 Construcción del ensamble Cn-cps1::v5::mTq2 ............................................................................. 44 10. Ligación ........................................................................................................................ 46 11. Transformación de E. coli electrocompetentes ........................................................................... 46 12. Transformación de E. coli quimiocompetentes ........................................................................... 47 13. Miniprep para extracción de ADN plasmídico ............................................................................. 47 RESULTADOS Y DISCUSIÓN .................................................................................................... 49 1. Construcción de pGEM::Cn-cps1 ........................................................................................ 49 2. Diseño de plásmidos del sistema FRET ................................................................................ 52 3. Construcción del plásmido MpYES2-7::Cn-cps1:v5 ......................................................................... 53 4. Construcción de los plásmidos del sistema FRET ........................................................................... 54 CONCLUSIONES ................................................................................................................... 58 PERSPECTIVAS ....................................................................................................................... 58 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ............................................................................................... 59 ANEXOS .......................................................................................................................... 63 1. Equipos ............................................................................................................................. 63 2. Tablas complementarias ...................................................................................................... 64 3. Constancia de participación con póster en el congreso de hongos SMB. ............................. 71 | |
| dc.format | application/PDF | |
| dc.language.iso | spa | |
| dc.publisher | Biblioteca Digital wdg.biblio | |
| dc.publisher | Universidad de Guadalajara | |
| dc.rights.uri | https://www.riudg.udg.mx/info/politicas.jsp | |
| dc.subject | Sistema Fret Fluorescence Resonance Energy Transfer | |
| dc.subject | Monomeros | |
| dc.subject | Acido Hialuronico | |
| dc.subject | Sintasa | |
| dc.subject | Cryptococcus Neoformans | |
| dc.title | Diseño y construcción de un sistema FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) capaz de detectar la formación de complejos entre monómeros de la sintasa de ácido hialurónico (CPS1) de Cryptococcus neoformans | |
| dc.type | Tesis de Licenciatura | |
| dc.rights.holder | Universidad de Guadalajara | |
| dc.rights.holder | Velázquez López, Yazmin Jeanette | |
| dc.coverage | GUADALAJARA, JALISCO | |
| dc.type.conacyt | bachelorThesis | |
| dc.degree.name | LICENCIATURA EN INGENIERIA EN ALIMENTOS Y BIOTECNOLOGIA | |
| dc.degree.department | CUCEI | |
| dc.degree.grantor | Universidad de Guadalajara | |
| dc.rights.access | openAccess | |
| dc.degree.creator | LICENCIADO EN INGENIERIA EN ALIMENTOS Y BIOTECNOLOGIA | |
| dc.contributor.director | Verdín Ramos, Jorge Alberto | |
| Aparece en las colecciones: | CUCEI | |
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|---|---|---|---|
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