1. RIUdeG
  2. Tesis
  3. Licenciatura
  4. CUCEI
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dc.contributor.advisorCórdova López, Jesús Antonio
dc.contributor.authorGaeta Tinoco, Diana
dc.date.accessioned2025-09-09T20:59:23Z-
dc.date.available2025-09-09T20:59:23Z-
dc.date.issued2024-05-29
dc.identifier.urihttps://wdg.biblio.udg.mx
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/20.500.12104/110295-
dc.description.abstractEn este trabajo se produjo la cepa recombinante (Haloferax volcanii H1424) para sobreexpresar y recuperar una carboxilesterasa en suficiente cantidad que permitiera su purificación y caracterización. Se empleó, exitosamente, un método de purificación por afinidad y se obtuvo un rendimiento entre 30-39%. Posteriormente, mediante electroforesis se verificó la pureza de la carboxilesterasa y se determinó su peso molecular. Se utilizó la carboxilesterasa pura para llevar a cabo cinéticas de hidrólisis empleando sustratos de ésteres de p-nitrofenilo en diferentes concentraciones para determinar las velocidades iniciales.
dc.description.tableofcontents1. INTRODUCCIÓN .................................................................................................. 11 2. ANTECEDENTES ................................................................................................. 13 2.1 Árbol filogenético ................................................................................................ 13 2.2 Organismos extremófilos .................................................................................... 14 2.3 Categorías de microorganismos extremófilos ..................................................... 14 2.4 Microorganismos halófilos .................................................................................. 15 2.5 Clasificación de microorganismos halófilos ........................................................ 16 2.6 Arqueas halófilas ................................................................................................ 16 2.7 Haloenzimas ...................................................................................................... 17 2.8 Haloferax volcanii ............................................................................................... 17 2.9 Halobacterium salinarum NRC-1 ........................................................................ 18 2.10 Carboxilesterasa recombinante .......................................................................... 18 2.11 Aplicaciones de las carboxilesterasas ................................................................ 22 2.12 Cinética enzimática ............................................................................................ 23 2.13 Parámetros enzimáticos ..................................................................................... 24 2.14 Transformaciones de la ecuación de Michaelis-Menten ..................................... 25 2.14.1 Modelo de Lineweaver-Burk ........................................................................ 25 2.14.2 Modelo de Eadie-Hofstee ............................................................................ 26 2.14.3 Modelo de Hanes-Wolf ................................................................................ 26 3. JUSTIFICACIÓN ................................................................................................... 28 4. HIPÓTESIS ........................................................................................................... 29 5. OBJETIVOS .......................................................................................................... 29 5.1 Objetivo general. ................................................................................................ 29 5.2 Objetivos específicos. ........................................................................................ 29 6. METODOLOGÍA ................................................................................................... 30 6.1 Cepa transformada de la arquea halófila ............................................................ 30 6.2 Medios de cultivo ............................................................................................... 30 6.3 Conservación de la cepa transformada .............................................................. 30 6.4 Producción de la enzima carboxilesterasa recombinante ................................... 31 6.4.1 Preparación del inóculo ............................................................................... 31 6.4.2 Producción de la enzima carboxilesterasa recombinante ............................ 31 6.4.3 Extracción de la enzima carboxilesterasa recombinante ............................. 31 6.4.4 Purificación de la enzima carboxilesterasa recombinante ........................... 32 6.5 Actividad lipolítica de la enzima recombinante ................................................... 32 6.6 Cinética de reacción de la carboxilesterasa recombinante ................................. 33 6.7 Parámetros cinéticos de la carboxilesterasa recombinante ................................ 33 6.8 Análisis estadístico ............................................................................................. 33 7. RESULTADOS ..................................................................................................... 34 7.1 Producción de inóculo de la cepa transformada de Haloferax volcanii ............... 35 7.2 Producción de la enzima carboxilesterasa recombinante ................................... 35 7.3 Extracción de la enzima carboxilesterasa recombinante .................................... 37 7.4 Purificación de la enzima carboxilesterasa recombinante .................................. 37 7.5 Cinéticas de hidrólisis de ésteres de p-nitrofenol de la carboxilesterasa recombinante ........................ 43 7.6 Determinación de Parámetros Cinéticos de la carboxilesterasa recombinante ... 45 8. CONCLUSIONES ................................................................................................. 55 9. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ...................................................................... 56 10. ANEXOS ............................................................................................................... 62
dc.formatapplication/PDF
dc.language.isospa
dc.publisherBiblioteca Digital wdg.biblio
dc.publisherUniversidad de Guadalajara
dc.rights.urihttps://www.riudg.udg.mx/info/politicas.jsp
dc.subjectCarboxilestera Recombinante
dc.subjectHalobacterium Salinarum Nrc-1
dc.subjectArquea Halofila Extrema
dc.subjectHaloferax Volcanii
dc.titleEstudio cinético de una carboxilestera recombinante de Halobacterium salinarum NRC-1, una arquea halófila extrema, sintetizada por Haloferax volcanii
dc.typeTesis de Licenciatura
dc.rights.holderUniversidad de Guadalajara
dc.rights.holderGaeta Tinoco, Diana
dc.coverageGUADALAJARA, JALISCO
dc.type.conacytbachelorThesis
dc.degree.nameLICENCIATURA EN INGENIERIA EN ALIMENTOS Y BIOTECNOLOGIA
dc.degree.departmentCUCEI
dc.degree.grantorUniversidad de Guadalajara
dc.rights.accessopenAccess
dc.degree.creatorLICENCIADO EN INGENIERIA EN ALIMENTOS Y BIOTECNOLOGIA
dc.contributor.directorOrtega De La Rosa, Nestor David
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