Identificación de variantes en los genes HBA2, HBA1, HBD, HBB, HFE y TMPRSS6 en pacientes mexicanos con microcitosis

Abstract

Introducción. La microcitosis es la disminución del volumen de los eritrocitos, su prevalencia ha sido reportada en 5.4% y 34.3% en poblaciones seleccionadas. Las enfermedades que cursan con microcitosis son en su mayoría los trastornos del hierro de origen adquirido, sin embargo, existen causas genéticas, siendo más comunes las talasemias; además, estas patologías pueden coexistir, lo que hace más complejo el cuadro clínico y el diagnóstico. El abordaje de la etiología de la microcitosis por causas genéticas considerando el perfil de hierro no se ha realizado en nuestra población, por lo que se incluyó la detección de variantes en el gen TMPRSS6 que se han relacionado con anemia por deficiencia de hierro refractaria al hierro (IRIDA, del inglés Iron Refractory Iron Deficiency Anemia), así como la búsqueda de las variantes c.187C>G y c.845G>A en el gen HFE relacionadas con sobrecarga de hierro. Asimismo, se adicionó la identificación de variantes en el gen HBD a la de los genes HBA2, HBA1 y HBB que ya se han estudiado previamente en pacientes con microcitosis. Objetivo. Identificar el tipo de variantes en los genes HBA2, HBA1, HBD, HBB, HFE y TMPRSS6 y sus características hematológicas y bioquímicas en pacientes mexicanos con microcitosis. Material y métodos. Se realizó un estudio descriptivo transversal en pacientes mexicanos con microcitosis, previa firma del consentimiento informado, captados entre marzo de 2019 a abril de 2022. Se determinaron el perfil hematológico (citometría hemática) y el perfil bioquímico (perfil de hierro, cuantificación y electroforesis de hemoglobinas, y pruebas de fragilidad osmótica). Se identificaron las variantes en los genes HBA2, HBA1 y HBB mediante pruebas moleculares en tamiz: PCR-ARMS, PCR-Gap, secuenciación Sanger y MLPA. Las variantes c.187C>G y c.845G>A del gen HFE se tamizaron por PCR-ARMS y las variantes en los genes HBD y TMPRSS6 se obtuvieron mediante secuenciación Sanger. El análisis estadístico comprendió tablas de contingencia, prueba 

2 o exacta de Fisher; se determinó la normalidad de los datos y se utilizó estadística paramétrica o no paramétrica de acuerdo con los resultados. Todas las pruebas estadísticas se interpretaron con un valor de pA y 

Cd24 T>A. El grupo con SH presentó en su mayoría un alelo de talasemia beta y/o una patología inflamatoria y/o tratamiento con hierro; además, en siete de ellos se encontró en estado heterocigoto la variante c.845G>A en el gen HFE, que son factores que pueden favorecer la SH. Los pacientes con refractariedad al tratamiento con hierro presentaron anemia, microcitosis, hipocromía, hierro y saturación de transferrina disminuidas, la mayoría tuvo ferritina disminuida y solo seis presentaron valores normales. Se encontraron cinco variantes en el gen TMPRSS6, una variante en la unión del sitio aceptor del intrón 15 y el exón 16 correspondiente a la deleción de un pentanucleótido (rs60484081), dos variantes de tipo missense en el exón 16 (rs377054987 G>A y rs1384127820 T>A) y dos variantes en el exón 17, una variante de tipo missense (rs855791 T>C) y una variante sinónima (rs2235321 C>T); sin embargo, no se encontraron diferencias estadísticas en los perfiles hematológicos y de hierro considerando el número o el tipo de variante. Conclusiones. Con la estrategia utilizada en el presente proyecto, el porcentaje de pacientes sin diagnóstico molecular que explique la microcitosis se redujo del 30% al 17.7%. El 26.5% de los pacientes con microcitosis y probable talasemia presentó deficiencia de hierro. La coexistencia de tal- con DH fue frecuente (13.6%), por lo tanto, debe tomarse en cuenta al momento del diagnóstico dada la similitud de los parámetros hematológicos. El 12.2% presentó sobrecarga de hierro, la mayoría en coexistencia con talasemia beta, alguna patología inflamatoria o tratamiento con hierro, y siete de ellos presentaron la variante HFE:c.845G>A que pueden incrementar el riesgo de sobrecarga. Las variantes de tipo missense encontradas en el gen TMPRSS6 pueden estar asociadas con microcitosis, sin embargo, se requieren de más estudios para confirmar su presencia como agente causal.